Ensaio clínico randomizado

class: title-slide, left, middle
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background-position: 97% 95%, 95% 7%
background-size: 10%, 33%

# .my-blue[Ensaio clínico randomizado]
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## **Efeito da droga vegetal de *Eclipta prostrata* (L.) L. (*Asteraceae*) no ângulo de fase em adultos com obesidade grau I**
 
### .blue[Gustavo Santos Paiva Laender Moura]
### .blue[03 de fevereiro de 2025]

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class: inverse, middle, center

# Introdução / Justificativa
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layout:true

## Eclipta *prostrata* (L.) L. *(Asteraceae)*

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class: top, left
background-image: url(img/eclipta.png)
background-position: 95% 65%
background-size: 25%

.pull-left-wide[
 
- Erva ereta ou prostrada, perene ou de curta duração .small[(Robineau et al., 2014)].
- Gênero *Eclipta* .small[([NCBI:txid53718](https://www.ncbi.nlm.nih.gov/Taxonomy/Browser/wwwtax.cgi?mode=Info&id=53718&lvl=3&lin=f&keep=1&srchmode=1&unlock))] e à família Asteraceae .small[([NCBI:txid4210](https://www.ncbi.nlm.nih.gov/Taxonomy/Browser/wwwtax.cgi?mode=Info&id=4210&lvl=3&lin=f&keep=1&srchmode=1&unlock))].
- Primeira descrição por Linné em *Mantissa plantarum* .small[(LINNÉ, 1771)]

** Uso tradicional** no Ayurveda - *Charaka Samhita*, séc. II A.C. .small[BHAVANA; SHREEVATHSA, 2014].

- Estudos etnofarmacológicos registram seu uso em diversos países 
 .small[(Feng et al., 2019; Kaur et al., 2020; Kyaw et al., 2021)].

]

---
class: top, left

.pull-left[
** Compostos bioativos**
- **Complexo fitoterápico:** cumestanos, saponinas triterpênicas e esteroidais, triterpenos, esteroides, flavonoides, ácidos fenólicos, entre outros .small[(Timalsina & Devkota, 2021)].
Mais de 150 fitoconstituintes já foram identificados .small[(Timalsina & Devkota, 2021)].

- **Principal marcador:** Wedelolactona .small[([PubChem CID 5281813](https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Wedelolactone); Kim et al., 2023)]
]
.pull-right[
 ![](img/wedelo.png)
.small[Fonte: [PubChem](https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Wedelolactone)]
]

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### *Evidências Pré-Clínicas*

- .my-coral[**Atividade Anti-inflamatória**;] .small[(Bhattacharyya & Law, 2022; Kumar et al., 2005; Tewtrakul et al., 2011; Kang et al., 2022)].

- .my-coral[**Atividades Hipolipemiante**;] .small[(Timalsina & Devkota, 2021)]

- .my-coral[**Atividades Hipoglicemiante**;] .small[(Le et al., 2021; Yao et al., 2022; Gupta et al., 2017; Gupta et al., 2018)]

- .my-coral[**Atividade Ansiolítica**.] .small[(Banji et al., 2010; Lobo & Manavalan, 2008)]

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### *Evidências Clínicas*

**.my-coral[Efeito Anti-hipertensivo, Diurético e Hipocolesterolemiante**]
- Ensaios clínicos demonstraram reduções significativas na pressão arterial (PAS, PAD e PAM) e melhora no perfil lipídico .small[(Rangineni et al., 2007)].

**.my-coral[Efeito Anti-hiperglicemiante**]
- Ensaios randomizados mostram redução da glicemia de jejum e pós-prandial, com desempenho comparável à metformina .small[(Sazia et al., 2015a; Sazia et al., 2015b; Hasan et al., 2013)].

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### *Ensaios Clínicas Fase II*

.my-blue[***Rangineni; Sharada; Saxena (2007)***:]
- 73 homens sedentários (40–55 anos) com HAS leve; 60 completaram o estudo.
  - *Grupo Eclipta* (n = 30): 1g 3x/d por 60 dias.
  - *Controle:* cápsulas placebo.

- **Resultados:**
 - .my-coral[PA]: Redução de 19% na PAS, 12% na PAD e 15% na PAM.
 - .my-coral[Lipídios]: Redução de 17% no colesterol total, 24% no LDL-c, 14% nos triglicerídeos e 24% na VLDL.
 - .my-coral[Urina]: Aumento de 34% no volume urinário e 24% na fração de excreção de sódio (p < 0,01).

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### *Ensaios Clínicas Fase II*

.my-blue[***Sazia et al. (2015):***]
 - 48 pacientes recém-diagnosticados com DM2 (20–60 anos), randomizados 1:1. 
 - *Grupo Eclipta*: 800 mg 3×/dia por 3 meses. 
 - *Controle:* Dieta para diabéticos e mudanças de estilo de vida (MEV). 
 - **Resultados:** Redução significativa na glicemia de jejum (p<0,05) e pós-prandial (p<0,01) em todas as aferições.

.my-blue[***Hasan et al. (2013):***]
  - Em 72 pacientes DM2, 
    - *Grupo Eclipta*: 800 mg 3×/dia por 3 meses.  
    - *Controle:* Orientação dietética e MEV
    - *Grupo metformina:* metformina 500 mg 1x/d
  - **Resultados:** EP melhorou significativamente a glicemia pré e pós prandial e o perfil lipídico, com resultados comparáveis aos obtidos com a metformina.

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## Justificativa

- A obesidade está associada à .my-blue[inflamação crônica de baixo grau]  
  .small[*(LUO & LIN, 2021; KINLEN, CODY & O’SHEA, 2018)*]

- A inflamação é proposta como o mecanismo central que liga a obesidade às .my-blue[complicações metabólicas e cardiovasculares] .small[*(KINLEN, CODY & O’SHEA, 2018; LUO & LIN, 2021)*]

- A OMS e o Ministério da Saúde incentivam pesquisas clínicas com .my-blue[fitoterápicos] .small[*(WHO, 2005; MINISTÉRIO DA SAÚDE, 2008)*]

- A *Eclipta prostrata* apresenta atividade .my-blue[anti-inflamatória] documentada .small[*(BHATTACHARYYA & LAW, 2022; KANG et al., 2022)*]

- A segurança do uso em humanos está documentada, sem registros de .my-blue[toxicidade] nas doses tradicionais .small[*(GERMOSÉN-ROBINEAU, 2005; PEREIRA et al., 2020a)*]

- O .my-blue[ângulo de fase] é um marcador sensível para detectar inflamação crônica de baixo grau .small[*(BOSY-WESTPHAL et al., 2006; YAMADA et al., 2022)*]

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# Hipótese
____

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Em indivíduos com .my-coral[obesidade grau I] submetidos ao tratamento convencional para perda de peso com intervenção nutricional, a administração da **droga vegetal de _Eclipta prostrata_**, na dose de `750 mg por via oral, três vezes ao dia`, durante um período de `3 meses`, resulta em um aumento estatisticamente significativo do ângulo de fase em comparação com o grupo placebo.

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class: inverse, middle, center

# Objetivos
____

---
    # Objetivos
## Objetivo geral

Avaliar a atividade anti-inflamatória da **droga vegetal de _Eclipta prostrata_** em indivíduos com .my-coral[obesidade grau I] submetidos ao tratamento convencional para perda de peso com intervenção nutricional, por meio do impacto no ângulo de fase derivado da análise de impedância bioelétrica, em comparação ao placebo.

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layout: true

## Objetivos específicos

---

### Descrever o perfil epidemiológico
1. idade;
1. sexo; 
1. etnia autodeclarada;
1. hábitos de vida: tabagismo, etilismo, atividade física e hábitos alimentares; 
1. comorbidades e medicamentos de uso contínuo.

### Avaliar a segurança da intervenção

1. Parâmetros clínicos;
1. Exames laboratoriais para monitorizar sinais de toxicidade assintomática
1. Eletrocardiografia.

---

1. .my-blue[***Desfecho primário:***] ângulo de fase derivado da BIA; 
1. .my-blue[***Desfecho secundário:***] proteína C reativa sérica.

### Desfechos exploratórios
1. Pressão arterial;
1. Lipídios séricos (colesterol total, LDL-c, HDL-c, triglicerídeos);
1. Perfil glicêmico (glicemia de jejum, hemoglobina glicosilada).

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class: inverse, middle, center
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# Materiais e Métodos
____

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name: ethics
## Aspectos Éticos

.pull-left[
- **Boas Práticas para Pesquisa Clínicas**
  ([ICH Guidelines](http://www.ich.org/home.html))

- **Aprovação Ética:** Comitê de Ética em Pesquisa da FMRP-USP  
  
- **Registro do Estudo na plataforma [REBEC](https://ensaiosclinicos.gov.br/rg/RBR-5wy4vhx)  **
  
- **Acesso ao Patrimônio Genético** da *Eclipta prostrata*  conforme a Lei nº 13.123/2015 (Atestado de Regularidade de Acesso nº A7CDD30)
]
---

---

layout: false
## Determinação da Dose
 ###Droga Vegetal de *Eclipta Prostrata*###

- **Regulação:** Ensaios clínicos devem utilizar a mesma dose e posologia do .my-coral[uso tradicional] .small[[ANVISA (2014), MS (2008) e WHO (2005)]].

- **Uso Tradicional:** .my-coral[2 a 3 g/dia], de forma fracionada. .small[(Kambli; Khaires; Kushwaha, 2022)].

- **Ensaios Clínicos Anteriores:**  
  - Rangineni; Sharada; Saxena (2007) utilizaram .my-coral[3 g/dia];  
  - Hasan et al. (2013) e Sazia et al. (2015a, 2015b) utilizaram .my-coral[2,4 g/dia].
  
---

## Determinação da Dose 
 ### Droga Vegetal de *Eclipta Prostrata*

***Dose Adotada no Estudo***

.my-red[_750 mg, 3 vezes ao dia (totalizando 2250 mg/dia), administrada com café da manhã, almoço e jantar.]_

**Equivalência à Dose Máxima Recomendada:**

.my-red[_13,8% da dose máxima_] recomendada para ensaios clínicos, com base em estudos de toxicidade em modelo animal .small[(FDA, 2005)].

---

## Cálculo do Tamanho Amostral
**Dados Populacionais:** 
- 214.732 adultos na Alemanha - ângulo de fase estratificado por idade, sexo e IMC: .my-coral[_Ângulo de fase < percentil 10 se correlacionou com PCR elevada_.] .small[(BOSY-WESTPHAL et al., 2006)].

- Estudo na **população brasileira**, em 2122 indivíduos [22,5% com IMC > 30 kg/m²], apresentou resultados semelhantes .small[(MATTIELLO; MUNDSTOCK; ZIEGELMANN, 2022)].

**Relação entre Média e Percentil 10:**

.my-coral[_A média populacional do AF foi 15% maior que o percentil 10, com diferença média de 0,84°_] .small[(0,78° para mulheres e 0,89° para homens).]

**Premissa de Benefício Clínico:**

Consideramos clinicamente relevante um incremento de 0,28° (um terço de 0,84°) associado a intervenção.
---

![](img/sample_size.png)
???

- **Parâmetros para o Cálculo [comparação entre 2 médias]:**  
  - .my-blue[Grupo _Eclipta_:] incremento médio de .my-red[0,28°];  
  - .my-blue[Grupo placebo:] incremento médio de .my-red[0,14°] .small[(50% do do grupo DVEP - efeito placebo e Hawthorne)];  
  - .my-blue[Desvio padrão médio]: 0,21°.

- **Tamanho Amostral:**  
  Com nível de significância de 0,05 (bicaudal) e poder de 80%, obteve-se um tamanho amostral de 37 participantes por grupo .small[(SINGER, 2001)].

---

## Gestão de Dados

**[Plano de Gestão de Dados](https://doi.org/10.48321/D1N34D):** DMPTool usando o template Digital Curation Centre.

**Plataforma de Coleta:** Instância FMRP do <img src="img/redcap.png" alt="Logo REDCap" style="width:100px; vertical-align:middle;" />

**Projetos REDCap:** .my-coral[*os links dão acesso direto aos codebooks*]
- **Projeto Principal ([PID 1958](https://gsplmoura.github.io/DVEP/REDCap/PID%201958%20DVEP.pdf)):** 34 instrumentos de coleta e 821 campos
- [PID 2184](https://gsplmoura.github.io/DVEP/REDCap/PID%202184%20Patient%20outreach.pdf): Para o público verificar elegibilidade;
- [PID 2246](https://gsplmoura.github.io/DVEP/REDCap/PID%202246%20Eligibility%20assessment.pdf): Para avaliação completa de elegibilidade pela equipe de pesquisa;
- [PID 2205](https://gsplmoura.github.io/DVEP/REDCap/PID%202205%20National%20Cancer%20Institute%20Thesaurus%20%7C%20REDCap.pdf): Suporte operacional com códigos do _NCIT_ para indexação de comorbidades e medicamentos.

**Confiabilidade na coleta de dados:**  
  Lógicas condicionais, campos calculados, campos redundantes e alertas para validação de resultados, assegurando a integridade dos dados.

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## Protocolo Experimental

###**Tipo de Estudo**

**Ensaio clínico de intervenção, fase II, randomizado 1:1, triplo cego, controlado por placebo, com grupos paralelos.**

###**Intervenção** (90 dias)  
  - **Grupo _Eclipta_:** .my-blue[intervenção nutricional] + .my-coral[droga vegetal de *E. prostrata* (2250 mg/dia)];
  
  - **Grupo Placebo:** .my-blue[intervenção nutricional] + .my-coral[placebo na mesma dose e posologia].

**Cegamento:** cápsulas e frascos indistinguíveis.

**Três avaliações clínicas**: na inclusão, aos 45 dias, e aos 90 dias.

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## Critérios de Inclusão e Não-Inclusão

###**Inclusão:**

Adultos (18 a 59 anos) de ambos os gêneros com obesidade grau I, acompanhados pela ESF de Jardinópolis - SP.  
  
 ###**Não-Inclusão:**

- Comorbidades associadas a inflamação crônica de baixo grau;
  - Histórico de uso crônico de anti-inflamatórios ou imunossupressores; 
  - Distúrbios disabsortivos e alterações anatômicas do trato gastrointestinal;
  - Condições que interfiram na análise de impedância bioelétrica;
  - Diarreia crônica;
  - Restrição de liberdade/incapazes de consentir adequadamente.

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class: middle, left
    ## Critérios de Exclusão

- Retirada do consentimento.

- Eventos adversos, relacionados ou não à pesquisa, conforme deliberação do **comitê de monitoramento externo**.

- Mulheres que se tornem gestantes ou desejem engravidar durante o período do estudo.

- Outros eventos imprevistos, conforme deliberação do **comitê de monitoramento externo**.

---
class: inverse, middle, center
## Seleção e Recrutamento
____

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background-image:url(img/poster.png), url(img/jardinopolis.png)
background-position: 70% 50%, 1% 1%
background-size: 35%, 40%
---
background-image:url(img/survey_1.png)
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---
exclude: true
background-image:url(img/survey_2.png)
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---
background-image:url(img/survey_3.png)
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---
exclude: true
background-image:url(img/survey_4.png)
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---
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background-image:url(img/survey_5.png)
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---
exclude: true
background-image:url(img/survey_6.png)
background-size:contain
---
exclude: true
 ###**Parceria Institucional:** 
 Colaboração com a Secretaria de Saúde de Jardinópolis-SP e divulgação via ESF.
 
 ### **Procedimento:**  
  - Potenciais participantes preenchiam formulário no REDCap;
  - Contato com potenciais participantes;
  - Verificação de elegibilidade pela equipe de pesquisa;
  - Obtenção do consentimento livre e esclarecido
  - Inclusão no estudo

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## Randomização

- **Geração da Sequência:**  
  - [Sealed Envelope](https://www.sealedenvelope.com/simple-randomiser/v1/lists): Criada em 03/07/2023 pelo Prof. Dr. Fábio Carmona.
  - Parâmetros: blocos aleatórios de tamanho 4 ou 6, lista com 148 itens (alocação 1:1).
  - _Seed 177782464738902_
  
- **Procedimento:**  
  - A sequência foi encaminhada exclusivamente à farmácia
  - Os frascos (droga vegetal ou placebo) são idênticos, diferenciados apenas pelo rótulo que contém o número de alocação.
  - Participantes são designados por ordem de inclusão (ex.: o primeiro participante recebe o frasco com o número 1).

---
class: middle, left
## Procedimentos
.small[

|Procedimentos                                                                            | T1 | T2 | T3 |
|:----------------------------------------------------------------------------------------|:--:|:--:|:--:|
|Avaliação clínica                                                                        | ✕  | ✕  | ✕  |
|Coleta de dados demográficos                                                             | ✕  |    |    |
|Parâmetros de segurança: clínicos, eletrocardiográficos, laboratoriais, pressão arterial | ✕  | ✕  | ✕  |
|Avaliação e quantificação da ingestão de etanol e uso de tabaco                          | ✕  |    | ✕  |
|Avaliação da prática de atividade física                                                 | ✕  | ✕  | ✕  |
|Dispensação dos frascos contendo as cápsulas designadas                                  | ✕  | ✕  |    |
|Avaliação da adesão à intervenção                                                        |    | ✕  | ✕  |
|Avaliação nutricional                                                                    | ✕  | ✕  | ✕  |
|Avaliação do recordatório alimentar e intervenção nutricional                            | ✕  |    | ✕  |
|Aferição de peso, altura e circunferência abdominal                                      | ✕  | ✕  | ✕  |
|Aferição da força de preensão palmar e BIA                                               | ✕  |    | ✕  |
|Aplicação dos escores WHOQOL-BREF, DASS-21, ECAP                                         | ✕  |    | ✕  |
Legenda: T1 – primeira avaliação clínica (dia 0); T2 – segunda avaliação clínica (dia 45); T3 – terceira avaliação clínica (dia 90)
]

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## Medidas de Segurança

- **Medidas adotadas no estudo:**  
  - A *Eclipta prostrata* é considerada segura em humanos .small[Instrução Normativa Nº 5 (ANVISA, 2010) e RDC nº 26 (ANVISA, 2014), GERMOSÉN ROBINEAU et al. (2014)].
  - Diretrizes da OMS .small[(WHO, 2005)] e do Ministério da Saúde .small[(MS, 2008)] para **ensaios clínicos com fitoterápicos**.
  
- **Avaliações presenciais:**  
  - Avaliação clínica completa
  - Exames laboratoriais para pesquisa de toxicidade assintomática hepática, renal, musculoesquelética, hematológica e endócrino-metabólica.
  - Monitorização de toxicidade cardiovascular com avaliação clínica e ECG.
  
- **Monitoramento Contínuo:**  
  - Questionário semanal automático via REDCap: sintomas, adesão e dúvidas.  
  - Notificações (via e-mail) enviadas ao pesquisador principal caso ocorram sintomas.

---
exclude: true
class: top, left
    ### Parâmetros de Segurança Recomendados

| Sistema                       | Parâmetros de Segurança                                                                           |
|-------------------------------|---------------------------------------------------------------------------------------------------|
| **Neurológico**               | Ausência de sintomas neurológicos                                                                  |
| **Pele**                      | Ausência de reações alérgicas (evidências clínicas)                                                |
| **Musculoesquelético**        | Ausência de artrites/mialgias; valores normais de CPK                                               |
| **Gastrointestinal**          | Evidência clínica de tolerância                                                                    |
| **Fígado**                    | Valores normais de AST, ALT, FALC e bilirrubina total                                               |
| **Rim**                       | Valores normais de ureia ou creatinina                                                              |
| **Endócrino e Metabólico**    | Valores normais de albumina/proteína total, ácido úrico, glicose, colesterol, amilase/lipase, sódio/potássio e cálcio |
| **Cardiovascular**            | ECG e pressão sanguínea normais                                                                    |
| **Hematopoiético**            | Valores normais no hemograma total                                                                 |

_Fonte: MINISTÉRIO DA SAÚDE, 2008_

---
    ## Medidas de Segurança
### Comitê de Monitoramento Externo

- **Composição:**  
  - Formado por três pesquisadores com titulação mínima de Doutor.

- **Funções e Ações:**  
  - Recebemam relatórios periódicos sobre recrutamento, seguimento e parâmetros de segurança.
  - Autonomia de decidir pela exclusão de participantes ou interrupção do estudo.

---

## Manejo dos Dados e Análise Estatística

- **Definição dos Desfechos:**  
  - *Primário*: ângulo de fase pós-intervenção.
  - *Secundário*: concentração sérica de PCR.
  - *Desfechos exploratórios*: pressão arterial, parâmetros de segurança, perfil lipídico/glicêmico.

- **Fonte dos Dados:** Banco de dados longitudinal.

- **Processamento:** .small[[(APÊNDICE H – Código R)](https://gsplmoura.github.io/DVEP/1_DVEP.html)]
  - Importação e limpeza dos dados em R.
  - Recodificação e padronização das variáveis.

- **Análise exploratória** .small[[(APÊNDICE I – Código R)](https://gsplmoura.github.io/DVEP/2_DVEP_Results.html)]

---

### Modelagem Estatística

- **Objetivo:** Para as variáveis dependentes, avaliar mudanças ao longo do tempo e controlar confundidores.
- **Modelos Utilizados:**  
  - Regressão linear e modelos mistos generalizados (GLMM).
  - Inclusão de termos fixos para intervenção, tempo e interações.
  - Inclusão de termos aleatórios para capturar variabilidade interindividual.
- **Covariáveis Adicionais:** Idade, sexo e hábitos de vida.
- **Ferramentas:** Pacote [**lme4**](https://cran.r-project.org/web/packages/lme4/index.html) com seleção baseada no critério de informação de Akaike (AIC).
- **Análise de Sensibilidade**: avaliar a robustez dos resultados.
    - **Métodos:** avaliação de outliers, manejo de dados faltantes, avaliação de possíveis vieses relacionados à adesão ao tratamento e ao impacto de valores extremos.
- **Apresentação dos resultados**: estimativas com intervalos de confiança de 95%, valores de p ajustados para múltiplas comparações via método de Bonferroni.
- **Visualização:** tendências longitudinais e diferenças entre grupos ilustradas com gráficos [(**ggplot2**)](https://cran.r-project.org/web/packages/ggplot2/index.html)

---
class: inverse, middle, center

# Resultados e Discussão  
____

---
## Recrutamento

O recrutamento ocorreu entre **agosto de 2023 e julho de 2024**:
  - 668 candidatos manifestaram interesse;
  - 147 avaliações completas de elegibilidade;
  - 102 participantes elegíveis.
  - .my-coral[75 participantes incluídos]

---
class: inverse, middle, center
# Resultados e Discussão  
____

## Características Basais dos Participantes

---
layout:true

### Características Demográficas

---
____

- .my-coral[**75 participantes**], sendo .my-coral[**86,6%] do sexo feminino**.

- A **idade média** foi de .my-coral[**40,6 anos**] (IC 95% 38,3–43,0).

- Distribuição dos participantes entre os grupos:
  - **Grupo Placebo**: 37 (49,3%)
  - **Grupo _Eclipta_**: 38 (50,7%)

- A intervenção teve duração média de .my-coral[**94,4 dias] (IC 95%: 88,8–99,9)**.

---

#### Comparação entre Grupos

- **Não houve diferenças significativas** entre os grupos para:
  - Idade
  - Sexo
  - Etnia
  - Estado civil
  - Situação de emprego
  - Histórico de hipertensão arterial e resistência insulínica
  - Uso de medicamentos de uso contínuo com potencial influência no peso
  
- **Exceção**: O **nível de renda** foi significativamente diferente (_p_ = 0,01).
- A distribuição de **renda mensal** foi:
  - **Grupo Placebo**: maior proporção na faixa de **R$3.001,00 - R$5.000,00**.
  - **Grupo _Eclipta_**: maior proporção na faixa de **R$1.001,00 - R$3.000,00**.
  
---

#### Tabela: Características Basais dos Participantes

|Característica | Grupo Placebo (N=37) | Grupo *Eclipta* (N=38) | Valor p |
|:---------------------------------------|:--------------------:|:----------------------:|:----------:|
|Idade em anos [média (IC95%)] | 39,9 (37,1–42,8) | 41,3 (37,7–45) | 0,5641 |
|Sexo feminino (%) | 81,1 | 92,1 | 0,1908 |
|Etnia branca (%) | 73,0 | 81,6 | 0,4864 |
|Estado civil: Casado (%) | 59,5 | 71,1 | 0,1227 |
|Emprego em tempo integral (%) | 73,0 | 65,8 | 0,4160 |
|Número de coabitantes [média (IC95%)] | 3,6 (3,2–3,9) | 3,4 (3,0–3,8) | 0,4623 |
|Tempo de estudo em anos [média (IC95%)] | 11,6 (10,8–12,4) | 10,5 (9,5–11,5) | 0,1085 |
|Renda mensal < R$3.000 (%) | 48,6 | 65,8 | **0,0101** |
|Hipertensão (%) | 16,2 | 31,6 | 0,1981 |
|Resistência Insulínica ou DM2 (%) | 24,3 | 23,7 | 1,000 |
Legenda. DM2: Diabetes Mellitus tipo 2.]

---

```
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```

![](Slides_files/figure-html/unnamed-chunk-2-1.png)

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- A **aleatorização foi bem-sucedida**, pois não houve diferenças significativas entre os grupos para a maioria das características basais.

-   A **diferença na renda mensal** deve ser interpretada com cautela:

-   Perguntas baseadas em faixas podem não refletir com precisão a situação socioeconômica.  Alternativamente, questões como *"Sua renda é suficiente para atender suas necessidades?"* poderiam ser mais relevantes 
.small[(SILVEIRA, 2016)].

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### Exames laboratoriais

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#### Perfil metabólico dos participantes no momento da inclusão

|Exame Laboratorial          |   Global (N=75)   | Grupo Placebo (N=37) | Grupo *Eclipta* (N=38) | Valor p |
|:---------------------------|:-----------------:|:--------------------:|:----------------------:|:-------:|
|PCR (mg/L)                  |   7,4 (5,4–9,4)   |    6,5 (4,4–8,7)     |      8,3 (5–11,6)      |  0,385  |
|Colesterol total (mg/dL)    | 191 (183,6–198,1) |  191 (180,2–202,2)   |   190 (180,8–200,2)    |  0,924  |
|LDL (mg/dL)                 | 114 (106,7–120,5) |  116 (104,9–126,1)   |   112 (102,8–120,7)    |  0,595  |
|Hemoglobina Glicosilada (%) |   5,5 (5,3–5,6)   |    5,5 (5,3–5,8)     |     5,4 (5,1–5,7)      |  0,529  |
|TAG (mg/dL)                 |  128 (114–141,4)  |  129 (108,9–148,6)   |   127 (107,6–145,8)    |  0,885  |
|HDL (mg/dL)                 |  54 (50,8–57,1)   |     52 (48–56,2)     |      56 (51–60,5)      |  0,252  |
|Glicemia de jejum (mg/dL)   |  86 (80,9–91,6)   |     86 (79,2–93)     |     86 (78,1–94,8)     |  0,951  |
|Insulina (uIU/mL)           |  15 (11,1–19,6)   |    17 (8,8–25,5)     |     14 (11,8–15,3)     |  0,42   |
Legenda. PCR – Proteína C reativa (mg/L); TAG – Triglicerídeos (mg/dL); LDL – Lipoproteína de baixa densidade (mg/dL); HDL – Lipoproteína de alta densidade (mg/dL). A última coluna corresponde a comparação entre o grupo placebo e grupo Eclipta, realizada através do teste T de Student.
]

---

|Exame Laboratorial | Global (N=75) | Grupo Placebo | Grupo *Eclipta* | Valor p |
|:-------------------|:----------------:|:----------------:|:----------------:|:-------:|
|AST (U/L) | 22,4 (20,1–24,7) | 21,8 (18,9–24,7) | 22,9 (19,5–26,3) | 0,658 |
|ALT (U/L) | 25,8 (23,1–28,6) | 26,5 (22,8–30,2) | 25,2 (21,7–28,7) | 0,789 |
|GGT (U/L) | 33,2 (29,3–37,2) | 34,5 (28,5–40,5) | 31,9 (26,1–37,7) | 0,671 |
|FALC (U/L) | 78,4 (72,1–84,7) | 77,1 (69,2–85,0) | 79,6 (70,8–88,4) | 0,812 |
|Bilirrubina (mg/dL) | 0,6 (0,5–0,7) | 0,6 (0,5–0,7) | 0,6 (0,5–0,7) | 0,992 |
|Amilase (U/L) | 58,2 (53,6–62,9) | 59,1 (52,2–65,9) | 57,3 (49,9–64,7) | 0,764 |
|Albumina (g/dL) | 4,2 (4,0–4,3) | 4,2 (4,0–4,4) | 4,2 (4,0–4,4) | 0,956 |
|Ureia (mg/dL) | 34,1 (31,3–36,9) | 34,6 (30,1–39,1) | 33,5 (28,6–38,4) | 0,712 |
|Creatinina (mg/dL) | 0,89 (0,81–0,97) | 0,91 (0,79–1,03) | 0,87 (0,75–0,99) | 0,845 |
|CPK (U/L) | 108 (98,6–117,4) | 110 (96,2–123,8) | 106 (92,5–119,5) | 0,678 |
Legenda. AST – Aspartato aminotransferase (U/L); ALT – Alanina aminotransferase (U/L); GGT – Gama-glutamil transferase (U/L); CPK – Creatina fosfoquinase (U/L). A última coluna corresponde a comparação entre o grupo placebo e grupo Eclipta, realizada através do teste T de Student.]]

Os participantes não apresentavam alterações significativas nestes marcadores, contribuindo para a segurança do estudo e minimizando riscos de toxicidade.

---

layout:true

### Variáveis antropométricas e composição corporal

---

#### Estratificação por sexo

|Parâmetro                        | Sexo Feminino (N=65) | Sexo Masculino (N=10) | Valor p |
|:--------------------------------|:--------------------:|:---------------------:|:-------:|
|Índice de Massa Corporal (kg/m²) |   34,1 (32,1–36,1)   |   32,5 (31,4–33,6)    |  0,177  |
|Nível de Atividade Física (PAL)  |    1,4 (1,3–1,4)     |     1,4 (1,3–1,5)     |  0,643  |
Legenda. Média e o intervalo de confiança de 95% das variáveis IMC e nível de atividade física dos participantes, estratificados por sexo. Comparação entre os realizada através do teste T de Student.
]

Como esperado, as variáveis de composição corporal diferiram entre os sexos, à exceção do IMC.

|Parâmetro | Sexo Feminino (N=65) | Sexo Masculino (N=10) | Valor p |
|:------------------|:--------------------:|:---------------------:|:--------:|
|Ângulo de Fase (°) | 6,4 (6,1–6,6) | 7,0 (6,8–7,3) | < 0,001* |
|Resistência (Ω) | 548,1 (534,5–561,7) | 446,1 (410,3–481,9) | < 0,001* |
|Reatância (Ω) | 60,8 (58,5–63) | 55,1 (50,7–59,5) | 0,040* |
]

---
layout:true

### Variáveis antropométricas e composição corporal
#### [Sexo masculino, categorizado por grupo de alocação](https://gsplmoura.github.io/DVEP/Output/Baseline/Tables/bia_males.html)

---

.pull-left[
- **Grupo *Eclipta*** (N=3)
  - Maior peso e IMC  
  - Menor ângulo de fase 
]
.pull-right[
- **Grupo Placebo** (N=7)
  - Maior reatância e ângulo de fase  
  - Menor massa livre de gordura
]

_Não houve associação entre o sexo e o grupo de alocação (p = 0,19)._

|Parâmetro                        | Grupo placebo [média (IC 95%)] | Grupo Eclipta [média (IC 95%)] | Valor p [Teste t] |
|:--------------------------------|:------------------------------:|:------------------------------:|:-----------------:|
|Peso (kg)                        |        99 (92,6–105,3)         |      109,1 (105,6–112,6)       |       0,026       |
|Índice de Massa Corporal (kg/m²) |         31,8 (30,7–33)         |        34,1 (33,1–35,1)        |       0,026       |
|Ângulo de Fase (°)               |         7,2 (6,9–7,4)          |         6,8 (6,6–6,9)          |       0,035       |
|Resistência (Ω)                  |      461,3 (415,5–507,1)       |      410,6 (376,6–444,7)       |       0,122       |
|Reatância (Ω)                    |         57,8 (53–62,6)         |        48,8 (44,7–52,8)        |       0,026       |
]

---

***Limitações***

- Pequena amostra e desequilíbrio limitam comparações:
 - variações em estado nutricional/metabólico?
 - Força de preensão similar (p=0,66) 
 Influência de fatores neuromusculares? 
 Limitações da análise de BIA?
- Necessidade de estudos com amostras maiores

---

layout:true

### Variáveis antropométricas e composição corporal
#### [Sexo feminino (n=65), categorizado por grupo de alocação](https://gsplmoura.github.io/DVEP/Output/Baseline/Tables/bia_females.html)

---

_Peso, IMC, ângulo de fase e seus componentes não diferiram entre os grupos._
.small[

|Parâmetro                        | Grupo placebo [média (IC 95%)] | Grupo Eclipta [média (IC 95%)] | Valor p [Teste t] |
|:--------------------------------|:------------------------------:|:------------------------------:|:-----------------:|
|Peso (kg)                        |         92 (87,5–96,4)         |        88,7 (85,7–91,7)        |       0,243       |
|Índice de Massa Corporal (kg/m²) |         35,2 (31–39,4)         |        33,1 (32,4–33,9)        |       0,349       |
|Ângulo de Fase (°)               |         6,5 (6,1–6,8)          |         6,3 (5,9–6,6)          |       0,354       |
|Resistência (Ω)                  |       538,2 (519,3–557)        |      556,6 (537,3–575,9)       |       0,185       |
|Reatância (Ω)                    |        60,8 (57,8–63,8)        |        60,8 (57,5–64,1)        |       0,988       |
]

---

.pull-left-narrow[ **Grupo Placebo**]
.pull-right-wide[
Maior .my-coral[índice de massa livre de gordura] 
Maior .my-coral[água corporal total e água extracelular]
]
.small[

|Parâmetro                                | Grupo placebo [média (IC 95%)] | Grupo Eclipta [média (IC 95%)] | Valor p [Teste t] |
|:----------------------------------------|:------------------------------:|:------------------------------:|:-----------------:|
|Índice de Massa Livre de Gordura (kg/m²) |         18,7 (18–19,5)         |         17 (15,9–18,2)         |       0,016       |
|Água Corporal Total (L)                  |        37,8 (36,2–39,4)        |        34,2 (31,6–36,8)        |       0,024       |
|Água Extracelular (L)                    |        16,6 (16,1–17,2)        |        15,3 (14,2–16,3)        |       0,031       |
]

***No entanto:***
- A .my-coral[**reatância**] não diferiu entre os grupos, contrariando a expectativa de uma reatância mais elevada no grupo com maior massa muscular.
- A .my-coral[**força de preensão palmar**] não diferiu entre os grupos ➜ Limitação no tamanho amostral? Sensibilidade da BIA? Influência de fatores neuromusculares?

---
layout: false

## Participantes que Não Completaram a Intervenção

23 participantes (30,6%) não completaram os 3 meses.
- **Por Sexo:**
 - *Homens:* 4 abandonos (40% dos homens; 2 de cada grupo de alocação).
 - *Mulheres:* 19 abandonos (8 no grupo placebo e 11 no grupo intervenção).
 
- **Testes Estatísticos** para associações entre sexo e conclusão da intervenção:
 - *Qui-quadrado de Pearson:* p = 0,750.
 - Controlando pelo grupo de alocação: *Mantel-Haenszel* p = 0,664; OR = 0,559 (IC 95%: 0,137–2,287).

???
Não houve associação entre sexo e conclusão da intervenção.

Embora a taxa de abandono tenha sido maior nos homens, essa diferença pode ser atribuída ao acaso

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layout:true

## Eventos Adversos e Monitoramento

---

**Avaliações Clínicas:**  
- 184 realizadas; 134 (72,8%) sem ocorrências  
- 50 registros de eventos (27,1%) em 36 participantes (1–3 eventos/participante)

**Momento e Gravidade dos Eventos:**  
- 46% dos eventos ocorreram na 3ª visita (90 dias)  
- Testes estatísticos - momento da avaliação clínica vs. gravidade dos eventos   
  - Fisher: p = 1  
  - Mantel-Haenszel (controlando pelo grupo): p = 0,956  
.my-coral[O uso da *Eclipta* não aumentou o risco de eventos graves comparado ao placebo].

---

**Tipos e Geveridade:**  
- 64% dos eventos foram leves;
- Gastrointestinais foram os mais prevalentes (36%; 88% leves);
- Eventos infecciosos representaram 12% dos registros.
- Dois eventos graves (infecciosos), ambos não associados com a intervenção.

**Monitoramento Dinâmico:** 
 - Comitê de Monitoramento teve acesso, em tempo real, a relatórios dinâmicos do <img src="img/redcap.png" alt="Logo REDCap" style="width:100px; vertical-align:middle;" /> (incluindo registro completo dos eventos adversos, exames laboratoriais, ECGs, etc.) 
 - Nenhuma intervenção (interrupção ou exclusão de participantes) foi necessária
 
---
layout:false
class:inverse, middle, center

# Conclusões e Próximos Passos
____

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background-color: #f0f0f0
layout: true
class: top, left
    ## *Conclusões e Próximos Passos*

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###Grupos Balanceados
- Na análise exploratória dos dados basais, os grupos _Eclipta_ e Placebo foram comparáveis em quase todas as variáveis.
- Modelos estatísticos mais robustos, como regressões com inclusão de covariáveis, serão desenvolvidos para confirmar ou refutar as diferenças observadas nos parâmetros de composição corporal.

###Segurança
- O perfil de segurança foi satisfatório, com predominância de eventos leves e sem aumento de eventos adversos graves no grupo _Eclipta_.  
- Será realizada uma análise detalhada dos eventos registrados para filtrar os potenciais efeitos colaterais relacionados a *Eclipta prostrata*.

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###Tamanho Amostral no Sexo Masculino
- O tamanho amostral limitado no sexo masculino sugere cautela na interpretação dos resultados e a necessidade de ajustes nos modelos estatísticos, além de estudos com amostras maiores.

###Taxa de Abandono
- A taxa de abandono de 30,6% pode afetar o poder estatístico e a robustez dos achados.  
- Investigar os fatores que contribuíram para esse índice, considerando a possibilidade de viés caso os abandonos não tenham ocorrido de forma aleatória.
- Investigar estratégias validadas na literatura para aumento da taxa de retenção em estudos clínicos com participantes com obesidade.

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###Viabilidade  
- A conclusão do protocolo experimental e a robustez da coleta e manejo dos dados reforçam a viabilidade do estudo e a validade das análises futuras.

###Análises Pendentes
- Desenvolver uma variável composta que resuma a adesão à intervenção;  
- Desenvolver Modelos Lineares Generalizados Mistos para a análise do desfecho primário; 
- Concluir os testes estatísticos, incluindo análises de sensibilidade e de subgrupos, para confirmar a robustez dos achados finais.

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## .my-blue[_Agradecimentos_]

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